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  • 마우스 마취제로 Rompun을 단독으로 사용하려고 합니다. 그 용량을 어느 정도로 사용해야 할까요? 마우스/랫드 마취 및 안락사

    마우스 마취제로 럼푼(Rompun, 성분명: Xylazine)은 단독 사용하지 않습니다.

     

    마취란 일정기간 동안 동물 신체의 일부 또는 전신의 감각상실을 일으키고 실험동물에게는 통증을 주지 않고 실험처치 및 수술을 실시하는 것을 목적으로 하며 이것을 유도하는 약물을 지칭해서 마취제라고 합니다. α2- adrenergic agonist 계열에 속하는 럼푼은 마취제가 아닌 신경안정제 또는 진정제로 구별되며 마취제 전에 투여하는 전마취제에 속합니다. 
     

    전마취제는 동물을 진정시키고 마취제의 용량을 줄여서 마취의 유도 및 회복을 용이하게 하는 작용을 나타내나 단독 사용으로 마취를 유도할 수 없습니다. 마우스 마취에서 럼푼은 케타민 또는 졸레틸과 같은 해리성 주사마취제와 혼합해서 사용되며 이 때 럼푼의 용량은 동물상태, 처치 및 수술 시간에 따라 5-10mg/kg 의 용량으로 사용할 수 있습니다. 럼푼은 동물전용의약품으로 수의사 처방전이 있어야 구매 가능한 약품입니다. 
     

     

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    유사질문
    • 졸레틸이 마약류로 취급 되면서 마우스 마취에 비상이 걸렸습니다. 졸레틸 만큼의 효과를 갖고 있고 업체에서 쉽게 구할 수 있는 마취제가 있을까요?
    References
    • 1. Flecknell P, Lofgren JLS, Dyson MC, Marini RR, Swindle MM, Wilson RP. Preanesthesia, Anesthesia, Analgesia and Euthanasia. In: Fox JG, Anderson LC, Otto GM, Pritchett-Corning KR, Whary MT, eds. Laboratory Animal Medicine. 3rd ed. Academic Press; 2015:1135-1200.
      2. Gaertner DJ, Batchelder M, Hankenson FC, Hallman TM. Anesthesia and Analgesia in Rodents. In: Fish R, Danneman PJ, Brown M, Karas A, eds. Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. Academic Press;2008:239-297.
    •  
    동물실험 마취 마우스 Rompun 사용법 용량 졸레틸
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  • 케타민 등 향정신성의약품을 동물실을 통해 구매하거나 동물실에 관리를 요청해도 되나요? 마우스/랫드 마취 및 안락사

    향정신성의약품은 “마약류 관리에 관한 법률”에 의거 사용자가 직접 약품에 대한 허가신청 및 관리를 해야합니다.

     

    동물실험에 많이 사용되는 케타민, 졸레틸 등은 향정신성의약품으로 분류되는 약품으로 동물실험을 하는 연구자가 사용하고자 할 경우 “마약류 관리에 관한 법률’ 제35조 마약류취급학술연구자로 허가를 받아서 사용해야 합니다.

    “마약류취급학술연구자”란 연구기관 및 학술기관 등에서 학술연구를 위해 마약류의 사용을 필요로 하는 자로 정의되며 동물실험을 위한 관련 약품 사용 시 식품의약품안전처장의 허가를 받아야 합니다.허가 시 제출하는 서류에는 진단서, 학술연구계획서 및 학술연구자의 자격에 관한 서류 등이 포함됩니다. 

    허가 후에는 사용하는 약품의 종류에 따라 약품 사용(취급) 보고 의무가 발생하는데 약품 별로 사용 후에 사용 보고 기간이 상이합니다. (Ex: 케타민은 취급한 다음달 10일 이내, 프로포폴의 경우 취급한 날로부터 7일 이내 등)

    또한 마약류취급학술연구자 허가가 없는 경우 약품의 구매는 불가합니다. 여러 연구자의 다양한 실험이 이루어지고 약품 사용자와 관리자가 구분되는 일반적인 동물실험실 상황에서 사용자 편의를 위한 동물실험실 관리자의 향정신성의약품의 구매 및 관리는 진행되어서는 안됩니다. 

     

     

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    유사질문
    • 졸레틸이 마약류로 취급 되면서 마우스 마취에 비상이 걸렸습니다. 졸레틸 만큼의 효과를 갖고 있고 업체에서 쉽게 구할 수 있는 마취제가 있을까요?
    • 토끼 마취를 하려고 합니다. 졸레틸이나 케타민을 구할 수 있는 방법은 없는 건가요?
    References
    동물실험 향정신정의약품 케타민 구매 관리 마취제 졸레틸
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  • 우리 시설은 자동 급수가 기본인데, 새로 반입된 동물이나 이유시킨 동물들이 물을 잘 못 먹는 것 같아요. 어떻게 해야 할까요? 마우스/랫드 사육관리 질병

    -제안1: 이유시킨 마우스의 힘이 약하다면 어미와 분리하는 시기를 좀 늦추거나 일주일 정도 물병을 함께 공급해 보세요. 물병은 거꾸로 거치되어 중력의 영향을 많이 받아 쉽게 물이 배출되므로 키가 작거나 힘이 약한 마우스에게 더 좋은 음수 공급방법이예요.

     

    -제안2: 새로 도입한 마우스가 물을 먹지 못할 것 같아 걱정된다면 배송 박스에 들어 있던 water gel을 일주일 간 케이지에 함께 넣어 두세요.  적응 기간에는 물병을 함께 공급하는 것도 좋아요. 단,  실험동물 생산 업체는 대부분 자동급수 환경이므로 이 점을 참고하세요.

     

    - 제안3: 번식하는 마우스가 이유하는 4주령에도 키가 작은 편이라 물병 노즐에 입이 닿기 어렵고 힘도 약해 보인다면  분만과 포유 기간을 고려하여 water gel을 미리 구해서 사육실에 준비해 두었다가 제공하세요.  Water gel 대신 한천배지도 사용할 수 있으니 기관의 관리자와 상의하세요.

     

    그림 1: Techniplast 사 GM500 물병 노즐 높이(6cm), 자동급수 노즐 높이(5.5cm)

    마우스의 활동을 보장하기 위한 케이지의 권장 높이 : 12.7cm (The guide. 2011) 

    		 그림 2: E 사 자동급수 노즐과 마우스(www.avidityscience.com/water-systems) 그림 3: HydroGel® as an Emergency Water Supply Solution
     

     

     

     

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    유사질문
    • 마우스에게 적절한 음수공급 (물 공급) 방법은 무엇이 있나요?
    • 마우스가 자동급수에 잘 적응할까요?
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  • LMO Breeding에 사용하는 Background WT을 각기 다른 업체에서 구매해도 될까요? 마우스/랫드 번식

    C57BL/6J와 C57BL/6N은 유전적으로 매우 유사하지만 상당한 phenotypic difference가 확인 되었습니다. 따라서, background mice를 구입하는 업체는 크게 상관이 없지만 그 업체에서 어떤 계통의 마우스를 founder로 사용하여 실험동물을 제공하는지 확인한 후 반입해야 합니다. 유전자변형마우스(GEM)가 제작된 초기에는 대부분의 genetic background mice를 C57BL/6J로 사용했지만 최근 International Knockout Mouse Consortium(IKMC) 등에서 C57BL/6N을 사용하게 되면서 두 계통이 널리 사용되고 있으므로 보유한 마우스의 background strain을 숙지하신 후 구입처를 결정하시면 됩니다.

     

     

     


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    유사질문
    • LMO Background WT Mice의 구입 시 주의할 사항은 무엇이 있나요?
    • C57BL/6J와 C57BL/6N은 다른 계통인가요?
    References
    • 1. Simon MM, Greenaway S, White JK, et al. A comparative phenotypic and genomic analysis of C57BL/6J and C57BL/6N mouse strains. Genome Biol. 2013;14(7):R82.
    • 2. Champy MF, Selloum M, Zeitler V, et al. Genetic background determines metabolic phenotypes in the mouse. Mamm Genome. 2008;19(5):318-331.
    • 3. Toye AA, Lippiat JD, Proks P, et al. A genetic and physiological study of impaired glucose homeostasis control in C57BL/6J mice. Diabetologia. 2005;48(4):675-686.
       
    C57BL6J C57BL6N Background WT Strain LMO GEM
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  • 발모실험을 하기 위해 수컷 동물을 사용하는 이유가 무엇인가요? 마우스/랫드 해부 생리 종특이성

    Androgenetic alopecia(AGA)는 탈모의 가장 흔한 유형으로서 남성에서 주로 일어나는 탈모로 알려져 있지만 여성에서도 발생한다고 밝혀졌으며 암컷 마우스를 이용한 연구도 이루어지고 있습니다. Hair growth를 조절하는 기전은 hair-follicle cycling, endogenous, exogenous의 영향에 따라 나뉘며, 매우 다양한 요인들이 작용하므로 수컷 뿐 아니라 암컷 마우스를 이용하여 실험을 할 수 있습니다. 연구의 목적을 정하신 후 실험동물의 성별을 결정하시기 바랍니다.

     

     

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    유사질문
    • 발모실험은 왜 수컷을 사용하나요? 암컷은 안되나요?
    • 탈모실험은 어떻게 하나요?
    References
    • 1. Zhang C et al. Escape of hair follicle stem cells causes stem cell exhaustion during aging Nat Aging. 2021;889–903.
    • 2. Crabtree JS, Kilbourne EJ, Peano BJ, et al. A mouse model of androgenetic alopecia. Endocrinology. 2010;151(5):2373-2380.
    • 3. Paus R, Cotsarelis G. The biology of hair follicles. N Engl J Med. 1999;341(7):491-497.
       
    Hair Loss Hair Regrowth Androgenetic Alopecia 탈모 발모
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  • 마우스와 랫드 실험에 사용할 수 있는 항생제와 진통제는 무엇일까요? 마우스/랫드 실험방법

    마우스와 랫드에서 수술적 처치를 하는 경우 진통제와 항생제의 사용은 필수입니다. 약품에 따라 기관의 수의사에게 “처방전”을 받아 구입하거나 “연구자용 향정신성의약품 허가”를 받아 구입하시기 바랍니다. 동물약품 뿐만 아니라 인체용 전문의약품을 동물실험에 사용하는 것도 일부 허용되므로 거래처에 문의하시기 바랍니다.

     

     

     

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    유사질문
    • 실험용 마우스의 항생제와 진통제를 알려주세요.
    • 실험용 랫드에 사용할 수 있는 항생제와 진통제를 알려주세요.
    References
    • 1. Adamcak A, Otten B. Rodent therapeutics. Vet Clin North Am Exot Anim Pract. 2000;3(1):221-viii.
    • 2. Flecknell PA. Analgesia and post-operative care. In: Laboratory Animal Anaesthesia. 4th. Academic Press; 2016:141-192.
    • 3. Allweiler SI. How to Improve Anesthesia and Analgesia in Small Mammals. Vet Clin North Am Exot Anim Pract. 2016;19(2):361-377.
    • 4. Miller AL, Richardson CA. Rodent analgesia. Vet Clin North Am Exot Anim Pract. 2011;14(1):81-92.
    • 5. Morrisey JK, Carpenter JW. Formulary. In: Quesenberry KE, Carpenter JW, eds. Ferrets, Rabbits, and Rodents: Clinical Medicine and Surgery. 3rd ed. St. Louis: Saunders/Elsevier; 2012:566-575.
    • 6. Meert TF, Vermeirsch HA. A preclinical comparison between different opioids: antinociceptive versus adverse effects. Pharmacol Biochem Behav. 2005;80:309-326.
    • 7. Gaertner DJ, Batchelder M, Hankenson FC, Hallman TM. Anesthesia and analgesia for laboratory rodents. In: Fish R, Brown JM, Danneman PJ, Karas A, eds. Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. 2nd ed. San Diego: Academic Press; 2008: 239-297.
    • 8. Carpenter J. Exotic animal formulary. 5th ed. Elsevier; 2016 
    • 9. 수의사 처방관리 시스템. https://www.evet.or.kr/
    • 9. 대한민국 의약품정보의 표준 약학정보원 
    마우스 항생제 마우스 진통제 랫드 항생제 랫드 진통제 Exotic Animal Formulary 향정신성의약품
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  • Type 1 Diabetes 질환모델 마우스 종류를 알고 싶습니다 마우스/랫드 해부 생리 종특이성

    Type 1 diabetes 의 주요 특징은 pancreatic beta cell의 자가면역 파괴로 인해 insulin 생산의 부족이며 AKITA mice, NOD mice가 대표적이고 비만(obese)을 동반하지 않는 특징이 있습니다. 이 외에도 pancreatic beta cell을 손상시키는 streptozotocin을 이용하여 마우스에서 type 1 diabetes 동물모델을 만들기도 합니다. 하지만 chemical induced diabetes animal model은 rat이 더 일반적입니다. 더 자세한 내용은 참고자료를 활용하여 검토하시기 바랍니다. 

     

      NOD Ins2Akita(Akita) Streptozotocin
    Description

    Inbred polygenic model for autoimmune type 1 diabetes

    Hyperglycemia, Insulitis

    - Became diabetics by 30wks old : female>male

     

    Heterozygous mice develop insulin dependent diabetes

    -3~4wks : hyperglycemia, hypoinsulinemia, polydipsia, polyuria

    Simple model of hyperglycaemia

    Weight loss

    - C57BL/6

    - Nude mice
    Appearance  

    *그림출처: The Jackson Laboratory www.jax.org/strain


    스트렙토조토신 (Streptozotocin)
    스트렙토조토신은 미생물의 한 종류인 Streptomyces achromogenes에서 발견된 화합물로서, 세포 안에 들어갈 경우 free radical을 만들고 DNA alkylation을 유도하여 세포독성을 보이게 됩니다. 특히 췌장에서 인슐린을 분비하는 베타세포를 특이적으로 파괴하는 효과가 있기에, 마우스에 스트렙토조토신을 투여함으로써 베타세포를 파괴하여 제1형 당뇨병을 유도하는 동물모델을 만드는 것이 가능합니다.

     

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    유사질문
    • 어떤 종류의 당뇨 마우스가 있나요?
    • Streptozotocin으로 당뇨마우스를 만들 수 있나요?
    References
    • 1. The Jackson Laboratory www.jax.org/strain
    • 2. King AJ. The use of animal models in diabetes research. Br J Pharmacol. 2012;166(3):877-894.
    • 3. Bylander JE, Ahmed F, Conley SM, Mwiza JM, Ongeri EM. Meprin Metalloprotease Deficiency Associated with Higher Mortality Rates and More Severe Diabetic Kidney Injury in Mice with STZ-Induced Type 1 Diabetes [published correction appears in J Diabetes Res. 2018 Jul 5;2018:2462697]. J Diabetes Res. 2017;2017:9035038.
    • 4. Revsin Y, Rekers NV, Louwe MC, et al. Glucocorticoid receptor blockade normalizes hippocampal alterations and cognitive impairment in streptozotocin-induced type 1 diabetes mice. Neuropsychopharmacology. 2009;34(3):747-758.
    • 5. Graham ML, Janecek JL, Kittredge JA, Hering BJ, Schuurman HJ. The streptozotocin-induced diabetic nude mouse model: differences between animals from different sources. Comp Med. 2011;61(4):356-360.
       
    Type 1 Diabetes IDDM Diabetes Mouse Model AKITA Mice Streptozotocin 스트렙토조토신
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  • Type 2 Diabetes 질환모델 마우스 종류를 알고 싶습니다 마우스/랫드 해부 생리 종특이성

    Type 2 diabetes 마우스 모델은 congenic mutant mouse 인 Lepob/ob, Leprdb/db, KK-Ay 가 대표적입니다. 더 자세한 특징은 제시해 드린 참고자료를 활용하여 검토하시기 바랍니다.

     

    Lepob (B6 ob, ob/ob) Leprdb (B6 db) KK-Ay
    Description exhibit obesity, hyperphagia, transient hyperglycemia, glucose intolerance, elevated plasma, insulin hypometabolic, hypothermic, subfertile

    Identifiably Obese(3-4wks old)

    Elevation of plasma insulin(10-14days) and blood sugar(4-8wks old)

    Polyphagic, polydipsic, and polyuric
     

    		 8 weeks old-hyperglycemia, hyperinsulinemia, glucose intolerance and obesity
    Appearance

    ob/+ vs ob/ob

     

     

    *그림 출처: The Jackson Laboratory https://www.jax.org/strain

     

    Lep ob/ob 마우스와 Lepr db/db 마우스의 차이점

    두 마우스 모두 leptin이라는 식욕억제 호르몬 신호체계가 망가져 있다는 공통점이 있습니다. 다만 Lep ob/ob 마우스는 leptin 이라는 유전자에 spontaneous mutation이 발생한 것이며, Lepr db/db 마우스는 leptin 호르몬의 수용체 유전자에 spontaneous mutation이 발생한 것입니다.

    따라서 두 마우스 모두 leptin 신호체계가 제대로 작동하지 않는다는 공통점이 있으나, leptin 호르몬 유전자에 돌연변이가 발생한 ob/ob 마우스는 비만에 따른 생리이상이 강하게 나타나는 반면, leptin 수용체에 돌연변이가 발생한 db/db 마우스는 당뇨에 의한 생리이상이 강하게 나타납니다.

     

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    유사질문
    • Japan KK mouse, db/db mouse 외에 어떤 종류의 당뇨 마우스가 있나요?
    • ob/ob 와 db/db 마우스는 무슨 차이가 있나요?
    References
    • 1. The Jackson Laboratory https://www.jax.org/
    • 2. King AJ. The use of animal models in diabetes research. Br J Pharmacol. 2012;166(3):877-894.
    • 3. 의약품의 약리학적 평가기법 (당뇨병치료제). 식품의약품 안전처 발행, 2016. 
    • 4. Joost HG, Al-Hasani H, Schürmann A. Animal models in diabetes research. Humana Press; 2012. 
    •  
    Type 2 Diabetes NIDDM Diabetes Mouse Model Leptin ob/ob db/db
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  • 우리 시설이 Pinworm에 감염되었다고 하는데 어떻게 해야 하나요? 마우스/랫드 사육관리 질병

    Pin worm은 설치류에서 기생충 감염증을 일으키는 병원체이며 감염의 확산 속도가 매우 빠르므로 SPF 시설의 유지를 위해서 신속하게 방재(eradication)해야 합니다.

     

    1) 원인체: Syphacia obvelata와 Aspiculuris tetraptera, Syphacia muris 

     

    2) 특징 

    일반적으로 Syphacia obvelata와 Aspiculuris tetraptera가 복합 감염됩니다.

    핀웜은 감염의 확산속도가 빠르며 유충이 환경에 장시간(2-3주) 존재하며 SPF 환경을 지속적으로 오염시킬 수 있기 때문에 최선의 방재는 가능한 한 빨리 감염된 개체를 확인하여 분리하고 실험을 종료하는 것입니다.   

    핀웜 감염증은 일반면역을 가진 마우스와 랫드에서 생명을 위협하는 질병을 일으키지는 않지만 연구에 부적절한 환경을 조성하며 실제로 면역부전 마우스나 일부 유전자변형 마우스에서 직장탈(rectal prolapse), 거친 피모, 체중 감소 등의 증상을 보이기도 합니다.  실제 알러지 유발 실험에 영향을 미쳤다는 발표도 있습니다. 

    핀웜 감염증은 비교적 진단하기 쉽고(tape test) 치료할 수 있는 구충제(ivermectin 등)가 있지만 그 치료제가 번식율 및 출산에 미치는 영향이 부정적이므로 방재 기간 동안 확산 방지의 목적으로 검사와 함께 병행해야 합니다. 

     

    3) 교차감염의 가능성 

    핀웜 역시 기생충이기 때문에 교차감염이 일어날 경우 사람에도 감염이 가능합니다. 

    핀웜에 감염될 경우 무증상인 경우도 많으나, 간혹 항문의 요충은 가려움증 등의 불편함을 유발할 수 있고, 어린아이들의 경우 과민성 및 수면장애를 일으킬 수 있습니다. 

    핀웜의 수명은 대략 2개월 안팎이며 동물실에서 근무하는 전문가 역시 교차감염을 방지하기 위해 사육환경을 철저히 관리해야 합니다.

     

    Perianal tape test detecting Pinworm eggs: The sticky side of cellophane tape was attached to the perianal region mice and then it was pasted on microscopic slide. (eggs of Syphacia obvelata)
         		 Adult pinworm from the caecal and colonic washings: Mouse found positive for pinworm by Perianal tape test were sacrificed and the caecum and colon were dissected out.

     

    *그림출처: Chawla S, Jena S, Prusty BK. Different treatment regimen for eradication of pinworm (Syphacia obvelata) infection in mice colony. Journal of Animal Research. 2015;5:321-324.

     

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    유사질문
    • Pinworm이 마우스에만 감염되나요?
    • Pinworm에도 여러 종류가 있나요?
    References
    • 1. Chawla S, Jena S, Prusty BK. Different treatment regimen for eradication of pinworm (Syphacia obvelata) infection in mice colony. Journal of Animal Research. 2015;5:321-324.
    • 2. Pritchett KR, Johnston NA. A review of treatments for the eradication of pinworm infections from laboratory rodent colonies. Contemp Top Lab Anim Sci. 2002;41(2):36-46.
    • 3. Pritchett K, Johnston N. A review of treatments for the eradication of pinworm infections from laboratory rodent colonies. Contemp Top Lab Anim Sci. 2002;41:31-41.
    • 4. Wightman SR, Wagner JE, Corwin RM. Syphacia obvelata in the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus): natural occurrence and experimental transmission. Lab Anim Sci. 1978;28(1):51-54.
    • 5. Kellogg HS, Wagner JE. Experimental transmission of Syphacia obvelata among mice, rats, hamsters, and gerbils. Lab Anim Sci. 1982;32(5):500-501.
    • 6. Agersborg SS, Garza KM, Tung KS. Intestinal parasitism terminates self tolerance and enhances neonatal induction of autoimmune disease and memory. Eur J Immunol. 2001;31(3):851-859.
    • 7. Sueta T, Miyoshi I, Okamura T, Kasai N. Experimental eradication of pinworms (Syphacia obvelata and Aspiculuris tetraptera) from mice colonies using ivermectin. Exp Anim. 2002;51(4):367-373.
    • 8. Michels C, Goyal P, Nieuwenhuizen N, Brombacher F. Infection with Syphacia obvelata (pinworm) induces protective Th2 immune responses and influences ovalbumin-induced allergic reactions. Infect Immun. 2006;74(10):5926-5932.
    Pin worm Syphacia obvelata Aspiculuris tetraptera Oxyuridae 마우스 핀웜 랫드 핀웜
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