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지식 FAQ

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  • 꼬리가 없는 것은 Brachyury gene(T)의 변이(mutation)로 인한 증상으로 기형입니다.

    이 유전자가 변이된 수정란(embryo)은 중배엽 이상(mesoderm abnormality)과 척삭(notochord)의 미형성을 동반하게 되는데요. T/T형의 homozygote인 경우 자궁 내에서 사산되고, T/+형의 heterozygote인 경우 짧고 뭉툭한 꼬리를 갖게 됩니다. 이러한 증상은 기형으로, 번식에 사용하는 것은 바람직하지 않으며, 척추 또는 발생 과정의 실험에도 배제하는 것이 적절합니다.

     


     

    * 그림 출처: 가톨릭대학교 의생명사업연구원 실험동물연구센터

     

     

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    • 제 마우스가 꼬리가 짧은 거 같아요. 왜 그런거죠? 실험을 해도 될까요?
    • 1. Korzh V, Grunwald D. Nadine Dobrovolskaïa-Zavadskaïa and the dawn of developmental genetics. Bioessays. 2001;23(4):365-371.
    • 2. Ruvinsky I, Chertkov O, Borue XV, et al. Genetics analysis of mouse mutations Abnormal feet and tail and rough coat, which cause developmental abnormalities and alopecia. Mamm Genome. 2002;13(12):675-679. 
    • 3. Farkas DR, Chapman DL. Kinked tail mutation results in notochord defects in heterozygotes and distal visceral endoderm defects in homozygotes. Dev Dyn. 2009;238(12):3237-3247.
       
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  • 개체들끼리 털을 뽑는 털뽑기(barbering) 증상으로, 감염성 질병은 아닙니다.

    피부에 상처가 없거나 별다른 이상이 관찰되지 않는 상태라면, 이런 현상은 마우스가 스스로 또는 함께 자라는 다른 개체의 털이나 수염을 과도하게 그루밍하는 것입니다. 4마리 중에 탈모가 없는 1마리가 털을 뽑는 원인개체로 보이는데요. 털이 뽑힌 개체들은 2~3주가 지나면 다시 털이 자라지만, 이로 인해 예민한 반응을 보이거나 스트레스 증상이 확인 될 경우 원인개체를 분리해주는 것이 좋습니다. 주로 암컷 개체들 사이에서 서열 확인 시에 발생되는 것으로 알려져 있으나 수컷들에서도 이런 증상이 관찰될 수 있으며, 케이지 내에 마우스 하우스, play tunnel 등의 은신처와 nesting filter 등의 enrichment를 넣어주는 것이 예방에 도움이 될수 있습니다.

     

    * 그림 출처: 가톨릭대학교 의생명산업연구원 실험동물연구센터

     

     

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    • 암컷 마우스끼리 있는 케이지인데 자꾸 얼굴 옆 부분에 털이 빠져요. 혹시 어디에 감염된 것일까요?
    • 수컷 마우스들 주둥이 부위에 털이 듬성듬성 빠진게 보여요. 어디가 아픈 걸까요?
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  • C57BL/6N, 8~10주령의 경우 아래 표와 같은 정상 수치를 가집니다.

     

     

    * Non-fasted samples

     

     

     

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    • 마우스 CBC 정상수치는 얼마인지 궁금합니다
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    [준비]

     

    500㎕-1㎖ 주사기, 27~30G needle, heating 장치, Isoflurane 마취(선택)

     

     

    [방법]

     

    1. 마우스 체중과 투여량 확인. (체중의 1%를 넘지 않도록 함)

    2. 투여 전 5~10분간 마우스 꼬리를 따뜻하게 하여 정맥 혈관을 확장시킴.

    3. 동물을 가볍게 마취하는 것이 권장됨.

    4. 마취된 동물은 안전한 열원 옆 혹은 온수패드에 눕혀 마취하는 동안 체온을 유지함.

    5. 의식이 있는 동물은 보정장치를 사용함.

    6. 한 손으로 꼬리를 잡고, 다른 손으로 주사기를 잡음.

    7. 마우스 한마리당 하나의 주사기+needle 사용 권장함. 

    8. 주사기를 꼬리와 평행이 되도록 유지하면서 니들의 경사진 면이 위로 가도록 정맥으로 넣음.

    9. 정맥 내 needle이 위치하면 주사기 끝에 혈액이 비칠 수 있음. 제대로 위치를 잡았다면 needle이 정맥으로 부드럽게 들어감. 

    10. 천천히 주입함. 저항이 있거나 needle 위로 물집 혹은 흰색 영역이 나타나는 경우, needle을 제거하고 첫번째 위치 위에 다시 삽입해야 함.

    11. 주사 후 바늘을 제거하고 출혈이 멈출 때까지 부드럽게 압박함.

    2. 동물이 마취된 경우, 회복 과정에서 동물을 모니터링함.

    13. 동물을 케이지로 되돌리고 출혈이 다시 시작되지 않았는지 관찰함.

     

     

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    • 마우스 꼬리정맥주사 잘하는 노하우가 있을까요?
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    1. 1cc 주사기(tuberculin syringe), 25G  바늘(needle) 준비.

    2. 주사 바늘을 하복부의 정중선에 가까운 우측(마지막 유두의 앞내측)으로 위치시킴.

      - 복부 왼쪽에 위치한 액체로 찬 맹장을 피할 수 있음. 

      - 오른쪽에 위치한 소장은 바늘로 찔릴 가능성이 낮음. (간이 위치한 오른쪽 상복부를 찌르지 않을 것)

    3. 30도 각도로 바늘을 5mm정도 찔러 넣고, 다시 바늘을 90도로 세워서 복강내에 위치시킴.

    4. 주사기의 내관을 뒤로 당겨 혈액이나 황갈색 액체(장관내용물)가 빨리지 않는 것을 확인 후 약물을 주입함.

      - 바늘이 혈관, 장, 방광을 관통하지 않았는지 확인 가능함.

    5. 최대 20ml/kg까지 투여 가능함.

     

     

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    • 마우스 복강투여를 하고 주사기를 빼면 물질이 새는 경우가 있습니다. 주사방법에 문제가 있는 것일까요?
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  • 윤리적인 실험진행을 위해 전신 마취 후 채혈 진행하며 추가적으로 마취 점안액 사용이 권장됩니다. Micro-hematocrit capillary tube 혹은 pasteur pipette 사용합니다.

     

     

    1. 두경부가 움직이지 않도록 보정 후 채혈관 끝을 눈의 내측에 위치 시키고 안구에 상처가 생기지 않도록 채혈관을 회전시키며 안와로 밀어넣음.

    2. 모세관 작용으로 혈액이 채혈관으로 들어감. 보정 시 경부압박으로 호흡에 방해가 되지 않도록 주의가 필요함.

    3. 채혈 후 거즈로 눈에 상처주지 않도록 주의하면서 압박하여 지혈함.

    4. 2주 간격으로 양쪽 눈을 번갈아 가며 반복 채혈 가능함. (0.1~0.2ml)

     

     

     

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    • 살아있는 마우스에서 혈액을 많이 뽑고 싶습니다
    • 1. UCSF Office of Research. Institutional Animal Care and Use Program. 
    • 2. Carbone L. Pain management standards in the eighth edition of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2012;51(3):322-328.
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  • 일반적으로 체표면적 기준 환산 방법이 많이 쓰이고 있습니다. 동물투약량에 사람 대 동물 Km값을 곱해주면 사람 투약량이 나옵니다. 

    HED(mg/kg)= Animal Dose(mg/kg) x (KmAnimal/KmHuman)

     

     

    [예시 1]

     

    Mouse 120mg/kg은 Human의 몇 mg/kg에 해당하는가?

    120mg/kg x (3/37) ≒ 10mg/kg  

     

    마우스의 120mg/kg이 사람의 10mg/kg와 유사한 용량이라는 것을 의미합니다.

     

     

    [예시 2]

     

    Human 10mg/kg은 rat의 몇 mg/kg에 해당하는가?

    10mg/kg  / (6/37) ≒ 60mg/kg

     

    사람의 10mg/kg이 랫드의 60mg/kg와 유사한 용량이라는 것을 의미합니다.

     

     


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    • #Animal #Human #약물용량 #Human Equivalent Dose
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  • 마우스 청정화를 해야 하는 이유는 아래와 같습니다.

     

    - 병원성 미생물은 주로 동물에 감염되어 시설 내부로 침입하므로 감염이 의심되는 동물은 기관의 정책에 따라 반입이 어려울 수 있습니다. (각 기관별 동물 반입 기준 확인 필요)

    - 청정화로 감염이 제거된 동물을 실험에 사용하여, 동물실험의 신뢰성과 재현성을 확보할 수 있습니다. 

    - 특히 형질전환마우스의 경우, 반입 후 브리딩을 주로 하므로 장기간 사육되며 감염 전파의 위험이 높습니다.  

    - 동물실험에 영향을 미치는 환경인자 중에서 병원성 미생물은 동물의 건강에 직접적인 영향을 미침으로써 잘못된 실험결과를 초래할 뿐만 아니라 동물의 복지 및 작업자와 연구자의 건강에도 심각한 위해를 끼칠 수 있습니다. 

     

     

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    • 감염된 형질전환 마우스를 반입 하려는데 청정화를 해야 한다고 합니다. 청정화 해야 하는 이유를 구체적으로 알고 싶습니다.
    • 1. 농림축산검역본부 & 식품의약품안전처. 공동 동물실험 및/또는 실험동물 관련 위원회(IACUC) 표준운영 가이드라인. (2020.12.)
       
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  • 동물실험 기관에 상시고용수의사가 있는 경우 처방전을 발급받아 약물 구매가 가능하고, 상시고용수의사가 없는 경우 동물병원 수의사의 처방전을 발급받아 약물 구매 가능합니다.
     

    [상시고용수의사가 있는 경우]

     

    - 상시고용수의사는 고용된 기관 동물에 투여할 목적으로 동물용 의약품 처방전 발급 가능 (수의사법 제12조 제5항)

    - 수의사가 두 곳 이상에서 상시 고용된 경우, 한 곳에서만 상시고용 신고를 할 수 있으며 신고한 하나의 기관의 동물에 대해서만 처방전 발급 가능 (수의사법 시행규칙 제12조 제2항)

    - 처방 약품이 해당 기관 밖으로 유출되지 않도록 관리해야 함 (수의사법 시행규칙 제12조 제2항) 

     

     

    [상시고용수의사가 없는 경우]

     

    상시고용수의사가 아닌 동물병원 수의사의 처방전 발급이 가능 합니다.

     

     

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    • 실험동물에 사용하려고 럼푼을 구매 하려했더니 수의사 처방전이 필요하다고 합니다. 기관에 수의사가 없는 경우 처방전을 어떻게 받으면 될까요?
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  • 합사 및 단독사육은 동물이 사육되는 기관의 정책(규정/지침/가이드라인 포함)을 준수하여야 합니다. 단독 사육이 필요한 경우 동물실험계획서에 기재되어 IACUC의 승인을 득하거나 기관수의사와 협의해야 합니다.

     

    The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals에서는 사회적 동물종은 가능한 사회적으로 사육(합사)되어야 한다고 명시하고 있습니다. 하지만 사회적 동물종이라도 합사가 불가하고 단독사육 해야 하는 경우도 있으며, 이 경우 적절한 정당성을 확보해야 합니다.
     

     

    [단독사육의 정당성 확보 절차]

     

    1. IACUC의 승인을 득해야 하는 경우

     - 과학적 연구에 필요한 경우: 가능한 단독사육기간을 최단기간으로 설정하여 단독사육의 정당성을 확보함.

     

    2. 기관수의사와 협의해야 하는 경우

     - 동물 건강 이상

     - 사회성 결여 행동 (싸움 등)

     - 수술 후 회복 등

     

    [단독사육시 주의할 점]

     

    1. 과학적으로 연구에 영향을 주지 않는 한, 환경/식이/운동 enrichment 및 사람과의 상호작용을 제공함.

    2. 기관수의사의 조언을 받아 단독사육 동물에 점차적으로 합사 동물을 도입하는 것이 필요함.
     

    [특이사항]

    - 수컷 마우스: 종종 공격적이며 사회적으로 간주되지 않음. 이유기 혹은 그 전부터 같이 사육된 경우에만 합사 가능함.  한 케이지에서 장기간의 실험절차 혹은 번식을 위해 분리된 경우, 다른 수컷 마우스가 있는 원래 케이지로 되돌리기 어려움.

     

     

     

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    • 같은 케이지 동물이 자꾸 싸워서 단독 사육을 하려고 하는데 기관 및 IACUC의 승인을 받을 수 있을까요?
    • 동물을 수술했는데 같은 케이지에 다른 동물과 함께 사육하면 안될 것 같아요. 단독 사육해도 동물에 문제가 없을까요?
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