CO2 안락사는 밀폐된 챔버(Chamber)에 동물을 넣고 점진적으로 이산화탄소(CO2) 농도를 증가시켜 동물을 고통 없이 사망에 이르게 하는 절차입니다. CO2의 농도가 높아지면 동물은 수면 상태에 이르고 이후 저산소증으로 사망하게 됩니다. CO2 안락사는 훈련 받은 인력에 의해 적절한 장비와 기술을 사용하여 환기가 잘 되는 장소에서 수행되어야 합니다.
1. 안락사 챔버(Chamber)
CO2 안락사를 수행하는 챔버는 동물의 상태를 지속적으로 관찰할 수 있도록 투명하거나 적어도 내부를 볼 수 있는 재질로 만들어져야 합니다. 챔버에 너무 많은 동물이 들어가면 혼잡해질 수 있으므로, 각 동물이 정상적인 자세를 취할 수 있는 충분한 공간을 제공해야 합니다. 가능하다면 동물들이 원래 사육되던 홈 케이지에서 안락사를 수행하는 것이 좋습니다. 홈 케이지를 사용할 수 없는 경우, 다른 케이지에서 사육되었던 동물들을 혼합하지 말고 챔버를 사용하기 전 마다 청소하거나 새로운 챔버를 사용해야 합니다.
2. 안락사 절차
1) 압축 CO2 가스 사용: CO2 안락사에는 유량 조절기가 부착된 실린더에서 나오는 압축 CO2 가스를 사용하는 것이 권장됩니다. 드라이아이스, 소화기 또는 화학적 방법 등 다른 모든 CO2 소스는 이 목적에 사용해서는 안 됩니다.
2) CO2 미리 채우기 금지: 고농도의 CO2는 일부 설치류에게 스트레스를 주거나 고통을 유발할 수 있기 때문에 챔버를 미리 CO2 로 채우는 것은 허용되지 않습니다.
3) CO2 적정 유입 속도: 동물들의 고통 및 스트레스를 줄이기 위해 CO2 는 챔버 용적의 30-70% 비율로 분당 유입 (예: 10ℓ 용량의 챔버라면 CO2 를 분당 3~7ℓ의 속도로 유입) 되어야 하며, 이를 정확하게 조절하기 위해 CO2 유량계를 사용해야 합니다. 너무 낮은 유입 속도는 호흡곤란으로 인한 스트레스를 증가시킬 수 있으며, 너무 높은 유입 속도는 점막 통증을 유발할 수 있습니다.
4) 의식 소실 확인: CO2 에 노출된 후 2-3분 이내에 동물은 의식을 잃고 호흡이 정지됩니다. 의식 소실이 2-3분 이내에 발생하지 않으면, 챔버의 CO2 유입 속도 및 공급 상태를 점검해야 합니다. CO2 노출 후 최소 5분 이상 지속하여야 합니다.
5) 사망 확인: 동물의 호흡과 심박동 정지, 동공 확장, 눈 색상 변화 등을 확인하여 사망 여부를 확인합니다. 사망이 확인되지 않을 경우, CO2 노출을 계속하고 이후에 경추 탈구(Cervical Dislocation), 단두(Decapitation), 양측 개흉술(Bilateral Thoracotomy), 방혈(Exsanguination) 등의 물리적 추가 방법을 사용하여 확실히 사망에 이르게 합니다.
6) 사후 처리: 동물의 사망이 완료되면 CO2 유량계를 잠그고 챔버를 열어 동물의 사체를 폐기물 봉투에 담아 의료폐기물로 폐기합니다. CO2 는 공기보다 무겁기 때문에 사용 후 챔버를 뒤집어 비우고 소독제로 청소하여 남아 있는 CO2 를 제거해 CO2 가 미리 채워지는 상황을 방지해야 합니다. 또한 챔버는 사용 후 반드시 청소 및 소독하여 잔해나 페로몬 등이 새로운 동물들에게 스트레스를 유발하지 않도록 해야 합니다.
3. 신생 마우스(Neonate)의 안락사
출생 후 10일 미만 새끼는 CO2 로 유발되는 저산소증에 저항력이 있어 무의식 상태에 이르기까지 시간이 오래 걸릴 수 있으며 최대 50분 이상이 소요될 수 있습니다. 따라서 신생 마우스는 충분한 CO2 노출 시간을 제공하여 안락사를 시행하거나 또는 CO2 챔버에 10-15분 동안 넣어 두어 신생 마우스가 통증 자극에 반응하지 않는 무의식 상태에 도달하면 보조적인 방법(예: 경추 탈구 또는 수술용 가위를 이용한 단두)을 추가로 실시하여 안락사를 완료할 수 있습니다. CO2 만으로는 신생 마우스의 사망을 확실히 보장하기 어려우므로 CO2 로 마취를 유도한 후 추가적인 물리적 안락사 방법을 사용하여 사망을 확실히 해야 합니다.
4. 마우스 연령별 CO2 노출 시간 권장 사항
