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지식 FAQ

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  • [마우스 생리학적 수치]

     

         

    * 그림출처: Laboratory Mouse, KMPC Infographic Series. KMPC 제작.

     

    - Lifespan : 2~3 years
    - Body Temperature : 36.5~ 38.5 °C
    - Heart Rate : 310~840 /min 
    - Respiratory Rate : 80~230 /min
    - Urine Volume : 0.5~1ml /day
    - Gestation : 19~21 days
    - Estrus Cycle : 4~6 days
     

     

     

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    • 정상적인 마우스의 생리적 정보를 알고 싶어요
    • 1. Laboratory Mouse, KMPC Infographic Series. KMPC 제작.
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  • BALB/c nude는 inbred, Athymic Nude는 outbred mouse 입니다. BALB/c nude와 Athymic Nude 두 계통 모두 Foxn1 gene이 spontaneous mutation 되어 있어 털이 없고, 흉선의 발달이 저하되어 있는 표현형을 보이는데, 두 계통은 근교계(inbred)와 폐쇄군(outbred)의 차이로 구별됩니다.

     

    [Immunological Deficiencies]

     - Mutation : Foxn1nu

     - Athymic and T cell Deficient 

     

    폐쇄군(outbred)으로 유지되는 Athymic Nude, NU/NU 계통은 근교계(inbred)보다 평균 체중이 높기 때문에 침습적인 처치가 진행되는 orthotopic tumor model에 활용할 수 있습니다. 

     

     

     

     

    [누드마우스의 종류 (예시 : The Jackson Labolatory)]

     

    *그림출처: The Jackson Labolatory (USA)

     

     

    [면역부전 마우스의 여러 종류]

     

    면역결핍 마우스 중에서 가장 많이 사용되는 누드 마우스는 T세포만 결핍되어 있고 SCID 마우스는 T세포와 B세포가 기능적으로 결핍되어 있으며, NOD/SCID 마우스는 단핵구가 비정상인 NOD 마우스와 SCID 마우스를 교배하여 좀 더 면역이 결핍되도록 확립된 마우스입니다.  

     

    NOG 마우스와 NSG 마우스는 NOD SCID 마우스를 IL-2Rγnull 마우스와 교배하여 만들어진 마우스입니다. IL-2 수용체는 IL-2Rα, IL-2Rβ, IL-2Rγ로 구성되는데, 이 중에서도 IL-2Rγ는 IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, IL-21 등의 다른 사이토카인 수용체를 구성하는데 필요합니다. 따라서 NK 세포 발생에 중요한 사이토카인 신호 전달도 억제되므로 이들 마우스에서는 NK세포 면역도 결핍되게 됩니다.
     

     

    * 그림출처: Shultz LD, Ishikawa F, Greiner DL. Humanized mice in translational biomedical research. Nat Rev Immunol. 2007;7(2):118-130.

     

     

     

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    • NOG와 NSG의 차이점은 무엇인가요?
    • 1. Flanagan SP. 'Nude', a new hairless gene with pleiotropic effects in the mouse. Genet Res. 1966;8(3):295-309.
    • 2. Pantelouris EM. Absence of thymus in a mouse mutant. Nature. 1968;217(5126):370-371.
    • 3. Wortis HH, Nehlsen S, Owen JJ. Abnormal development of the thymus in "nude" mice. J Exp Med. 1971;134(3 Pt 1):681-692.
    • 4. Shultz LD, Ishikawa F, Greiner DL. Humanized mice in translational biomedical research. Nat Rev Immunol. 2007;7(2):118-130.
    • 5. Shultz LD, Lyons BL, Burzenski LM, et al. Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells. J Immunol. 2005;174(10):6477-6489.
    • 6. Ito R, Takahashi T, Katano I, Ito M. Current advances in humanized mouse models. Cell Mol Immunol. 2012;9(3):208-214.
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  • 동물실험에 수반되는 통증은 일반적인 동물관찰 지표로 예측할 수 있으며, 설치류의 경우에는 Grimace Scale이 개발되어 있어 통증 평가나 수술 후 적용되는 진통제의 효능 평가에 직접적으로 활용할 수 있습니다. 

     

    ※ 일반적인 동물관찰 지표 : 체중 변화, 사료 및 음수 섭취 변화, 외형 변화, 임상증상(심박수, 호흡수, 체온 등), 자극하지 않았을 때 행동 변화(고통징후), 외부자극 시 행동 반응 등 

     

    동물의 통증을 정확하게 평가하기 위해서는 정상동물의 생태에 대한 지식과 동물관찰 경험이 있는 연구자를 전담으로 지정하여 주기적, 객관적으로 관찰하는 것이 필수적이며, 실험동물의 통증은 저절로 조절되지 않으므로 통증 정도에 맞는 적절한 진통제를 사용하여 최소화하는 것이 중요합니다. 사람의 경우, 3세 미만의 소아 혹은 환자 스스로 통증을 정확히 표현하기 어려운 경우 FLACC등급을 사용하는데, 이러한 지표들도 동물실험에 참고할 수 있습니다. 

     

             

     

     

    [Pain Ladder(WHO)]

     

     

     

     

     

     

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    • 동물실험에서 통증을 수치화 할 수 있나요?
    • 1. Langford DJ, Bailey AL, Chanda ML, et al. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 2010;7(6):447-449.
    • 2. NC3Rs. Grimace Scales. https://www.nc3rs.org.uk/3rs-resources/grimace-scales
    • 3. Merkel SI, Voepel-Lewis T, Shayevitz JR, Malviya S. The FLACC: a behavioral scale for scoring postoperative pain in young children. Pediatr Nurs. 1997;23(3):293-297.
    • 4. World Health Organization. Cancer pain relief. 1986.
    • 5. IACUC 동물실험계획서 작성 및 심의평가 길라잡이(2020)
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  • 동물실험 시작 시 연구자들은 동물실험윤리위원회(Institutional Animal Care and Use Committee, 이하 IACUC)에서 규정한 절차와 원칙에 따라 동물실험절차를 계획하며, 반드시 연구 개시 전에 IACUC에 동물실험계획서를 제출하여 IACUC 승인을 받아야 합니다. 이후 단계는 각 기관별 상이할 수 있으나 대부분 아래 절차에 따라 동물실험을 시행하며, 자세한 절차는 해당 연구시설 관리자에게 문의하여 동물실험을 준비하기 바랍니다. 
     

     

     

     

     

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    • 동물주문부터 실험 시작까지 전체적인 절차를 한눈에 알고 싶어요
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  • 동물조직의 파라핀 블록 제작, 슬라이드 제작, H&E염색, 면역염색(IHC Stain), 면역형광염색(IF Stain), 특수염색 (Oil Red O, Masson's Trichrome, PAS, Sirius Red, Safranin O, Toluidine Blue, Alcian Blue 등) 등 실험동물의 조직병리검사는 동물실험 위수탁 업체에 의뢰가 가능합니다. 동물실험 위수탁 연구를 제공하는 업체의 정보(기관명, 소재지, 분야, 시험검사 품목 등)는 식품의약품안전처 시험검사기관 지정현황 사이트(https://www.mfds.go.kr/brd/m_627/list.do)에서 확인이 가능합니다.  또한 본인이 속한 연구기관 또는 학교가 자체 보유한 조직병리지원시설이 있을 수 있으니, 연구시설 관리자에게 조직병리지원이 가능한지 문의해 보시기 바랍니다. 그 외 포털 사이트에 ‘동물실험 조직병리수탁’ 등을 검색하여 조직병리 수탁 업체를 찾거나, 한국검체검사수탁기관협회 홈페이지에 게시된 협회 가입 수탁검사기관 중에서 실험동물 조직병리를 수행해주는 업체를 찾는 방법을 이용하실 수 있습니다.

     

    그 외 인터넷에 ‘동물실험 조직병리수탁’ 등을 검색하면 조직병리 수탁 업체의 정보를 확인할 수 있으며, ‘한국검체검사수탁기관협회(https://koarl.or.kr/institute/institute_view.php)’에서는 협회에 가입한 수탁검사기관 목록을 확인할 수 있습니다. 

     

     

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    • 마우스 조직병리검사를 의뢰하려고 합니다. H&E stain, 면역염색이 가능한 업체가 있을까요?
    • 동물병리조직 슬라이드 제작해 주는 곳을 찾고 있습니다.
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  • 마우스에 물린 후 응급조치와 소독을 했더라도 물림사고는 인체에 유해한 위험을 내포한 것으로 치명적인 병적상태를 유발할 수 있습니다. 따라서 실험실 관리자 또는 담당부서에 보고하고 관리자의 지시에 따라 병원에 방문하여 상처 소독 및 치료, 항생제 투여, 파상풍 확인 등 의료진의 치료를 받으시길 바랍니다.
     

    [동물실험 중 동물에 물린 경우 대처 방안]

     

    일반적인 동물교상은 동물의 이빨에 의한 관통상을 일으켜 힘줄 및 신경손상, 관절을 침범한 장애유발, 피부결손과 오염된 상처로 인한 장기간의 치료가 필요할 수 있으며, 상처에 따라 세균 감염률이 높고 다양한 바이러스성 전염을 유발할 가능성이 높습니다. 또한 신체적 상해의 문제 뿐만 아니라 인수공통전염병이나 알레르기 반응에 감염될 가능성도 있습니다. 따라서 이러한 사고가 발생하면 즉시 물과 비누로 씻고 사건보고 및 의료진과 상의 후 상처에 대한 평가, 상처소독 및 치료, 예방적 항생제 투여, 파상풍과 공수병 등을 확인해야 합니다.

     

     

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    • 랫트에게 경구투여 실습 중 랫트에 손가락을 물렸습니다. 병원에 가야할까요?
    • 1. Song HS, Kim JJ, Choi JG, Chun SH, Yee NH. Study on Analysis and Management of the Type of Laboratory Accident. Journal of the Korean Society of Safety. 2018;33(6):157–162.
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  • 주사 바늘 찔림 후 응급조치와 소독을 했더라도 사용된 주사기의 용도(유해물질, 종양 세포주, stz, mptp 등) 또는 상해부위의 감염노출 등 사고 시 상황에 따라 의료진의 진료가 필요할 수 있으니 실험실 관리자 또는 담당부서에 보고하고 관리자의 지시에 따라 대처하십시오. 뎅기열바이러스 취급 중 주사 바늘에 의한 감염 사례1와 실험동물에 암 이식 중 종양 세포주 취급 주사 바늘 찔림 사고에 의해 인간 종양 세포주가 인체에 감염된 사례2 등이 있습니다.

     

     

    [동물실험 중 날카로운 기구(주사 바늘, suture needle, knife 등)에 찔림 또는 베인 경우 대처 방안]

    상처 부위에서 혈액이 충분히 흘러나오도록 하며 물과 비누로 씻어낸 후 알코올이나 베타딘으로 손상부위를 소독해야 합니다. 사고 발생(찔림, 베임 등) 즉시, 관리자 또는 담당 부서에 보고하고, 지시에 따르도록 합니다.

     

     

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    • 종양 세포주를 마우스 복강에 투여 중 주사기 바늘에 찔렸는데 응급실에 가야 할까요?
    • 1. 뎅기열바이러스 취급 중 주사 바늘에 의한 감염 사례(국가연구안전정보시스템 연구실 사고사례)
    • 2. 암 이식 중 종양 세포주 취급 주사 바늘 찔림 사고에 의해 인간 종양 세포주가 인체에 감염된 사례. 2020년 한국생물안전안내서 제2판: 414.
       
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  • PET-CT란 양전자방출단층촬영술로서 양전자를 방출하는 방사성 약제를 정맥주사로 체내에 투여하여 이 약제의 분포상태를 추적함으로써 질병을 진단하는 검사법입니다. PET-CT 검사는 엄격한 의약품제조기준으로 제조된 방사성 표지물질을 이용합니다. 체내에 투여된 약제로부터 방출되는 방사선은 일반적으로 매우 짧으며 체내에 오래 지속되지 않아 안전한 물질입니다.
     

    공동활용이 가능한 마우스 PET-CT 를 소유하고 있는 기관은 ZEUX 라는 사이트에서 검색이 가능합니다. ZEUX는 공동 활용 장비의 정보(장비명, 설치장소, 장비용도, 활용범위, 장비소개, 장비사진, 연락처 등) 및 이용 가능 여부 확인 등 연구장비 공동활용 서비스를 제공하는 장비활용 종합포털 사이트입니다. 즉, ZEUX는 전국의 장비보유기관들이 공동으로 참여하여 만들어 나가는 클라우드 기반의 장비예약시스템으로 연구장비의 개방과 공유, 장비 이용에 대한 중개 · 알선 등의 서비스를 제공합니다. 공동 활용 장비 정보로는 장비명, 설치장소, 장비용도, 활용범위, 장비소개, 장비사진, 연락처 등이 제공됩니다. 

     


    ZEUX 장비활용종합포털(Zone for Equipment Utilization Service): www.zeus.go.kr

     

     

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    • 다른 기관의 공동 활용이 가능한 공용 장비 목록을 알 수 있을까요?
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  • 제조사료는 수입조제사료(Research Diets, Dyets, Envigo, Altromin 등)와 국내조제사료(연구자가 원하는 조성의 사료 조제 가능)로 나눌 수 있습니다. 인터넷에 ‘실험동물 조제사료’ 를 검색하면 조제사료 공급 업체의 정보를 확인할 수 있습니다. 
     

    [해외 조제사료 공급 업체]

     

    - Research Diet (대리점: 라온바이오, 새론바이오, 샘타코, 중앙실험동물)

    - Dyets (대리점: 중앙실험동물)

    - Envigo (대리점: 두열바이오, 라온바이오, 새론바이오) 

    - Altromin (대리점: 영바이오 http://www.youngbio.kr)

     


    [국내 조제사료 공급 업체]

     

    - 두열바이오텍(http://www.dybiotech.co.kr)

    - 라온바이오(http://www.raonbio.co.kr)

    - 새론바이오(http://saeronbio.com)

    - 샘타코(http://www.samtako.com)

    - 영바이오(http://www.youngbio.kr)

    - 중앙실험동물(https://labanimal.co.kr)

     

     

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    • High Fat Diet 사료를 만들어서 마우스에게 사용하려고 합니다. 주문 가능한 회사를 알려주세요
    • 마우스 사료에 특정 성분을 높이려고 하는데 국내에서 주문 사료 구입 가능한 곳이 있나요?
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  • 비임상시험(동물실험)에는 의약품, 의료기기, 화장품 등의 안전성, 유효성 평가, 비임상 GLP 독성시험 등이 있습니다. 식품의약품안전처에 인허가를 받아야 하는 비임상시험의 경우, 시험과정 및 결과의 신뢰성 확보를 위하여 식품의약품안전처 지정을 받은 ‘비임상시험실시기관’ 에 위탁을 해야 합니다. 이러한 ‘비임상시험실시기관’ 정보는 관련 법령에 따라 식품의약품안전처 홈페이지에 공고되어 있으며, ‘의료기기 비임상시험실시기관’과 ‘의약품분야 비임상시험실시기관’으로 나누어 주기적으로 업데이트 됩니다. 해당 공고를 통해 비임상시험실시기관의 기관명, 소재지, 시험분야, 시험검사 품목 등의 정보를 확인할 수 있습니다. 비임상시험실시기관으로 지정되지 않은 동물실험대행기관은 포털 사이트에서 ‘비임상 CRO’, ‘동물실험대행’ ‘동물실험서비스’ 등을 검색하면 동물실험위탁 가능 업체 정보를 확인할 수 있습니다. 
     

    [식품의약품안전처 시험검사기관 지정현황 사이트]

     - 바로가기: https://www.mfds.go.kr/brd/m_627/list.do

     

     

     

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    • 항암효능 관련 동물실험을 진행하고자 하는데 동물실험 비임상 전문 수탁기관 목록을 알려주세요
    • 마우스 관리와 Mating, 감염실험을 진행해주는 동물실험 대행업체를 알고 싶어요
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